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试管常用技术|细胞冷冻的原理及胚胎、配子的冻融

2022-09-06 15:47:06 幸孕行

幸孕行试管婴儿平台了解,目前冷冻技术在辅助生育技术中广泛应用,已成为人类辅助生育技术的重要组成部分,细胞冷冻的技术及其推广和普及已逐渐开放,长久保持细胞是比较关键的一环。那么下面幸孕行就从试管婴儿专家挖掘的资料为大家具体讲解一下细胞冷冻的原理及胚胎、配子的冻融。

 

细胞冷冻
 

细胞冷冻的原理及胚胎、配子的冻融

 

细胞冷冻技术是将胚胎和配子从生理温度降至低温并贮存的一项技术。当有需要时,再从低温状态解冻至生理温度。

 

一、人类胚胎和卵子的冷冻技术要点

 

1、人卵玻璃化冷冻:

 

(1)卵子冷冻皿的制备。

 

(2)卵子的平衡。

 

(3)VS中的操作。

 

2、胚胎玻璃化冷冻:

 

(1)冷冻皿制备。

 

(2)与培养室人员核对患者姓名和冷冻胚胎后,将需要冷冻的胚胎用巴斯德吸管从培养皿转移到预先备好的冷冻皿的A液中,轻轻的吹洗几次,去除胚胎表面及吸管头部的矿物油。

 

(3)平衡:将吹洗干净的胚胎转移B液的顶部,让其自由慢慢下沉不用吹吸,计时10~12min。

 

(4)将平衡好的胚胎迅速转移到右下角的第1个C液中,计时1min(包括第二个C液中的时间),在C液中不同位置轻轻的冲洗,然后转移至第二个C液中,避免沾有矿物油,然后装载体,迅速插入液氮,插入后在液氮中摇动,接着套上套管,放入支架或支管。

 

二、人类胚胎和卵子的解冻技术要点

 

(1)建议TS液体量要大,复温速度足够快是关键。

 

(2)将装液氮的容器和胚胎载体尽量靠近显微镜,以取得进入TS液之间最短距离。

 

(3)将载体从液氮中取出后,以最快速度放入TS中,并在显微镜下确定卵子/胚胎已从载体上落到 TS 中,然后再将载体移开。

 

(4)转移到DS时,可带有少量TS,把卵子/胚胎放入底部,液体会慢慢扩散,使卵子/胚胎慢慢适应DS。

 

三、单精子的冷冻解冻技术要点

 

(1)冷冻皿制备。

 

(2)冷冻过程:通过显微操作系统从精子混悬液滴中逐个视野查找,将找到的精子转移至冷冻载体薄片的G-IVF微滴中,全部查找结后,将G-IVF微滴中的精子转移入冷冻液滴中。用无菌镊子将冷冻薄片夹出,用无菌纱布吸去载体多余的矿物油,装入精子冷冻管中,旋紧螺帽,贴好标签,液氮上方 1 cm 熏蒸 15 min ,随即投入液氮中保存。作好精子冷冻记录。

 

(3)复苏前准备:将 4 ml 矿物油加入培养皿中,置于37℃培养箱中预温备用。

 

(4)复苏过程:双人核对患者夫妻姓名和冷冻日期,将精子冷冻管从液氮中取出,旋开螺帽,用无菌镊子将冷冻载体薄片夹出,迅速浸入37℃矿物油中复苏,37℃培养箱中孵育5 min。将冷冻标签贴在患者精液处理单,登记精子冷冻复苏记录。将含有解冻精子的冷冻载体薄片快速转移至ICSI操作皿中,备ICSI。

 

幸孕行试管婴儿平台希望加科技继续发展,继续进行细胞冷冻技术改良,推进试管婴儿工作进程具有重要意义。除此之外,尽管目前尚存许多还未解决的问题,但随着配子及胚胎冻存技术研究的不断深入和发展,人类胚胎库、人类卵子库,会像人类精子库一样,作为人类生育力的储备形式建立起来,并终将造福于人类本身。幸孕行希望广大需要进行试管婴儿的患者,尽快咨询我们,谨防病情延误!

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