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配子及胚胎冷冻技术解析

2022-07-12 03:55:00 幸孕行

每个生殖中心实验室均应该建立可靠的冷冻保存技术,冷冻过程及放入液氮灌的储存位置时应双人核对。


一、冷冻方法

 

配子及胚胎冷冻技术解析

虽然玻璃化冷冻技术中采用的冷冻保护剂浓度更高,可能带来胚胎毒性的风险,但玻璃化冷冻的卵母细胞、卵裂期胚胎和囊胚复苏率均明显优于程序冷冻技术。且从目前国内外获得的短期随访数据看来,玻璃化冷冻复苏的胚胎,移植后出生的新生儿,出生缺陷无明显增加,身长体重也未见明显异常。因此推荐采用玻璃化冷冻技术进行胚胎的冷冻。


二、卵母细胞冷冻

 

配子及胚胎冷冻技术解析
 


目前卵母细胞冷冻技术上不完全成熟,效率较低,建议仅用于因医学原因无法在取卵日受精的患者。HCG后36h取卵,取卵后2h玻璃化冷冻卵母细胞的复苏率显著高于取卵后5~6h冷冻的卵母细胞,因此建议在取卵后2h左右进行冷冻。冷冻复苏后的卵母细胞,纺锤体在2~3h重建,线粒体的膜电位2h后恢复,因此建议在复苏2~3h后进行ICSI。


三、胚胎冷冻


移植剩余的胚胎,可以考虑按照一定的质量标准选择后,进行胚胎冷冻。发育速度过慢或质量太差的胚胎,不论是卵裂期胚胎还是囊胚,其复苏后存活率和着床率都会显著降低。每个冷冻容器内的胚胎数量推荐结合拟复苏移植的胚胎数量和所在中心的复苏率来确定。玻璃化冷冻液中的平衡时间明显影响胚胎复苏率以及复苏后的发育能力,平衡时间的长短应该与


四、温度相适应

 

配子及胚胎冷冻技术解析
 


温度越高(37℃),平衡时间越短;温度较低(“室温”),平衡时间应该适度延长。扩张较充分的囊胚冷冻复苏后存活率较好,建议这些胚胎在进行玻璃化冷冻前应进行人工皱缩排出囊胚腔内的液体。复苏后胚胎存活的情况,可以根据胚胎形态和继续培养过程中胚胎发育情况来综合判断。能进一步发育的胚胎预后良好。卵裂期胚胎,如果复苏后有部分卵裂球发生损伤,提示胚胎发育潜能不良,不利于后续的临床结局。


五、冷冻记录


应该包括冷冻方法、每个容器内的胚胎数量、发育阶段、形态学评分、在液氮容器内的储存位置。为保证冷冻中的配子或胚胎的安全,应该监测液氮容器内的液氮液面位置,建立完善的冷冻管理制度。

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