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POS血清微囊泡microRNA高通量测序及生物信息学分析

2022-08-16 12:12:00 幸孕行

作者:潘茂美、李青汉、罗克燕、王德婧

单位:遵义医科大学,遵义医科大学附属医院生殖中心(贵州563000)

 

目的

 

包裹在细胞外囊泡中microRNAs(miRNAs)稳定存在于的循环血液中,因此血清miRNAs具有作为新的多囊卵巢综合征(PCOS)生物标志物的潜力。检测育龄期PCOS患者血清微囊泡miRNA的表达差异,探究其成为PCOS卵泡发育障碍的潜在生物标志物的可能性。

 

方法

 

收集20205-20216月在遵义医科大学附属医院生殖中心接受辅助生殖治疗(ART)的女性不孕症患者的血清,包括SOPCOS患者(PCOS组)和SO例因单纯输卵管因素或男性因素不孕症患者(对照组)。

 

POS血清微囊泡microRNA高通量测序及生物信息学分析
 

 

采用差速离心法提取微囊,通过透射电子显微镜、Westermblotting和纳米粒追踪分析(NTA)对鉴定微囊泡特征。采用miRNAs高通量测序方法构建miRNA表达普,qRT-PCR鉴定部分miRNAs。利用生物信息学工具分析差异表达显著的miRNA,对靶基因进行GO功能注释和KEGG通路分析。

 

结果

 

PCOS组与对照组相血清微囊泡中检测到730个稳定表达的miRNAs19个显著差异表达的微囊泡miRNAsP<0.05,|log2Flod Change|21.5),其中8个表达上调和11个表达下调。

 

POS血清微囊泡microRNA高通量测序及生物信息学分析
 

采用GO/KEGG分析提示这些miRNAs可能参与细胞间链接、细胞膜重构、细胞周期、细胞代谢调控等生物过程,涉及离子结合、DNA结合、酶活性等分子功能。主要富集通路主要参与各类炎症因信号途径:白细胞介素家族(包括IL-1家族、IL-4L-13IL-10)、TolI样受体4(TLR4)TAK1/NFkB等炎症信、途径、TGF-β家族信号通路、血浆脂蛋白的组装、重塑和清除、氧化应激、细胞周期以及胰岛素分泌的调节和凋亡的内在途径等信号通路。

 

结论

 

相比对照组,PCOS组血清微囊泡表达水平上调,集中于较小的直径范围内。组间差异表达显著的血清微囊泡miRNAs富集途径可能与炎症、脂质代谢、颗粒细胞增殖与凋亡和胰岛素分泌有关。

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